在細胞培育實(shí)驗室中,血清是常見(jiàn)的試劑之一,常見(jiàn)的血清種屬有人的和動(dòng)物兩種,依據客戶(hù)對產(chǎn)種類(lèi)屬與來(lái)源的挑選,價(jià)格也是不同的。
關(guān)于實(shí)驗新手來(lái)說(shuō),稍有不慎就會(huì )影響到實(shí)驗結果,甚至讓花費幾千元買(mǎi)來(lái)的血清失掉作用。今天我司與您討論“怎么奇妙使用血清培育細胞”。
咱們今天要說(shuō)的血管平滑肌細胞培育選用的是貼塊法,這種辦法具有取得平滑肌細胞純度高,量多,操作簡(jiǎn)潔的長(cháng)處。但用貼塊法易使平滑肌細胞胞質(zhì)內肌絲喪失,亞細胞器添加。
在這辦法中,大家可要注意啦!不同動(dòng)物血管結構有差異,豬和猴較易操作,但小動(dòng)物如兔、鼠因其血管小,血管壁薄等特色,使之難以分離。另外安排塊太薄,不易粘附培育基,也使細胞較難成長(cháng)。
我司特別提示,實(shí)驗中請注意:
1. 依據培育細胞的種屬加入適量的不同血清,一般可加入胎牛血清,若小牛血清增殖作用差,應加胎牛血清(FBS),通常濃度為10%~20%。
2. 培育基的挑選:常用的有DMEM,M199培育基。培育兔的平滑肌細胞用DMEM作用較好。
3. 種植安排塊的數目,如75cm2的長(cháng)頸瓶安排塊不得少于30。