細胞培養所需添加物

通常細胞體外培養時(shí)需要加入血清，以維持細胞的生長(cháng)和存活。而除了血清之外，部分細胞在培養過(guò)程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇等成分來(lái)維持細胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細胞加入量會(huì )有差異，需根據細胞類(lèi)型判斷。

胰島素作用廣泛，包括調節脂肪和蛋白質(zhì)的代謝以及促進(jìn)細胞生長(cháng)等。胰島素功能的發(fā)揮源于其對細胞的作用，進(jìn)而引起組織乃至機體的整體反應。一般可將胰島素在細胞水平的作用分為三大類(lèi)：代謝作用、促生長(cháng)作用、以及代謝和促生長(cháng)混合作用。胰島素對細胞的代謝調節作用主要是通過(guò)其與細胞膜上的胰島素受體（Insulin receptor, IR）相互作用而介導，而胰島素對細胞的促生長(cháng)作用則是通過(guò)其與細胞膜上胰島素樣生長(cháng)因子受體（IGF Receptor, IG）相互作用而介導的。在無(wú)血清細胞培養液中，常添加胰島素來(lái)維持細胞生長(cháng)，調節細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存，同時(shí)抑制糖原、蛋白質(zhì)和脂肪的分解。

細胞生長(cháng)分裂的過(guò)程中會(huì )釋放氧自由基，而氧自由基累積到一定程度會(huì )破壞細胞膜和細胞器膜，從而殺死細胞。這使得細胞達很難達到實(shí)驗所需的融合度，從而影響實(shí)驗的數據。β-巰基乙醇作為一種強還原，中和細胞培養基中積累的氧自由基從而改善細胞周?chē)h(huán)境。β-巰基乙醇在溶液中不穩定，因此需要定期添加。本公司產(chǎn)品β-巰基乙醇用DPBS稀釋?zhuān)瑵舛葹?0mM。例如：Thp-1細胞β-巰基乙醇終濃度為0.05mM，因此使用時(shí)需根據細胞培養要求添加。

丙酮酸鈉是最常見(jiàn)的丙酮酸鹽，是一類(lèi)內源性小分子物質(zhì)，丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內，并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫學(xué)上、診斷試劑以及醫療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。在人體中行動(dòng)中大多數細胞只利用葡萄糖作為能量的物質(zhì)就夠了，而在細胞培養中丙酮酸鈉是必須的物質(zhì)。丙酮酸鈉在培養基中起到替代碳源的作用，參與細胞營(yíng)養代謝。Hep G2，Caov-3及 NCI-H1395細胞培養基中就需要額外添加丙酮酸鈉，以維持細胞良好的生長(cháng)狀態(tài)。

保持細胞生長(cháng)良好狀態(tài)的法寶當屬抗生素，適量濃度的的抗生素可有效防止微生物的污染。青mei素-鏈mei素混合溶液（Penicillin-Streptomycin Solution, 100×）是專(zhuān)門(mén)用于細胞培養的雙抗，抗菌譜：革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。青mei素-鏈mei素-兩性mei素B混合溶液也是可用于細胞培，抗菌譜：細菌、真菌和酵母。細胞培養需要了解不同細胞生長(cháng)特性，還需要及時(shí)補充各類(lèi)營(yíng)養物質(zhì)以保持細胞良好的狀態(tài)。