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培養基傾注溫度小常識
更新時(shí)間:2025-07-22   點(diǎn)擊次數:105次

1、培養基的傾注適宜溫度約45℃。培養基放置于手心感覺(jué)不燙,但是放置于手背感覺(jué)燙時(shí),培養基溫度大約就是45C。培養基傾注時(shí)溫

度太高的話(huà),凝固時(shí)間較長(cháng),另外皿蓋上會(huì )有大量冷凝水,不利于后續實(shí)驗。溫度太低則容易出現倒板過(guò)程中瓶中培養基部分凝固的現

象。

2、有些培養基需要加入添加成分,這些添加成分在加入應先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。

3、目多數實(shí)驗室培養基滅菌后會(huì )放置水浴或者烘箱中,需使用的時(shí)候拿出來(lái)直接倒板。但培養基靜置時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),靜置時(shí)間一般不超

過(guò)4小時(shí)。靜置時(shí)間過(guò)長(cháng),培養基中瓊脂可能會(huì )少量凝固,形成類(lèi)似絮狀析出。

4、在實(shí)驗過(guò)程中不可避免因特殊情況而導致未倒板培養基已凝固,凝固后培養基可重新加熱溶解。一般來(lái)說(shuō)沸水浴或者電磁爐加熱,不

能重新再滅一次菌。

培養基的傾倒方法主要涉及以下幾個(gè)步驟:

1. 溫度調節。培養基傾注的適宜溫度大約為45C。如果溫度過(guò)高,會(huì )導致凝固時(shí)間延長(cháng),且皿蓋上會(huì )有大量冷凝水,不利于后續實(shí)驗。如

果溫度過(guò)低,則可能導致倒板過(guò)程中瓶中培養基部分凝固。

2. 添加成分。如果培養基需要加入添加成分,這些成分在加入應先放置到室溫,以避免冷的液體造成瓊脂疑結或形成片狀物。

3. 靜置時(shí)間。培養基滅菌后應放置在水浴或烘箱中,使用拿出直接倒板。培養基的靜置時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),一般不超過(guò)4小時(shí),以避免瓊脂少

量凝固。

4. 平板準備。倒皿,平皿應保持在35℃~40C的溫度。如果需要表面接種,有冷凝水的平板表面容易產(chǎn)生蔓延菌落。這時(shí)可放在有對流的

無(wú)菌凈化臺中吹干培養基表面,但不能過(guò)度干燥,否則培養過(guò)程中平板容易開(kāi)裂。

5. 傾注量。平板傾注量一般在18~20mL左右,如果培養時(shí)間超過(guò)48小時(shí)或培養溫度高于40C,為防止水分過(guò)量蒸發(fā)導致平板開(kāi)裂,傾注

量一般為25mL左右。

6. 避免氣泡。倒平板時(shí)盡量貼著(zhù)平皿壁緩慢倒入,將氣泡留在瓶子底部。如果平板中有少量氣泡的話(huà),可以把氣泡輕搖到平板壁上,這樣

不會(huì )影響結果觀(guān)察。

7. 混合均勻。每個(gè)平板中加入10mL融化的瓊脂培養基并迅速往復搖動(dòng)和轉圈晃動(dòng)5~15次使培養基與接種物充分混合。

8. 培養。待平板冷卻后翻轉并置于適當的溫度下培養。

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