一、每種試劑都有其*反應模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。
因孵育溫度高,反應時(shí)間長(cháng),會(huì )造成整板本底高,陽(yáng)性率高。溫育一般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應加蓋。
作為記錄測定結果的儀器,酶標儀的性能穩定與否,決定結果的可靠度。首先酶標儀應定期進(jìn)行保養,對濾光片要定期校正;其次酶標儀波長(cháng)設置要正確,使用雙波長(cháng),一個(gè)檢測波長(cháng),一個(gè)參比波長(cháng),以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標儀讀數時(shí)先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同,使用中應詳細閱讀說(shuō)明書(shū)。
二、在ELISA試劑盒中正確的洗滌是保證得到可重復結果的關(guān)健一步,應引起操作者重視。
無(wú)論是手工操作還是機器操作,得出不正確的結果常與不正確的洗滌有關(guān),ELISA就是靠洗滌來(lái)達到分離游離和結合的酶標記物的目的。通過(guò)洗滌以消除殘留在板孔中沒(méi)能與固體抗原或抗體結合的物質(zhì),以及在反應過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
綜上所述,ELISA試劑盒我們可以通過(guò)以上措施把非特異性顯色降至zui低限底,從而提高檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實(shí)驗結果。
在基因治療中,造血干細胞因為具有自我更新及分化為各種細胞系的能力而成為一種很有吸引力的靶細胞。ELISA試劑盒近年來(lái),將外源目的基因導入造血干細胞,以糾正或補償基因缺陷和異常引起的疾病,特別是血液疾病如腺苷脫氨酶缺陷病、血友病、地中海貧血癥及鐮狀細胞貧血癥中已取得重要的進(jìn)展。
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