人慢性髓系白血病細胞 （K562）

人慢性髓系白血病細胞 (K562)
細胞介紹：
該細胞是由Lozzio從一名53歲的慢性髓細胞性白血病急變期的女性患者的胸水中分離建立的。該細胞曾被認為來(lái)源于粒系，處于高度未分化階段；Anderson 等人作了細胞膜特性的研究后，認為該細胞是紅白血病細胞系。該細胞是對自然 殺傷細胞高度敏感的體外靶標，故而被廣泛應用于這方面的研究。K562的原始 細胞是一種具有多向分化潛能的造血系統的惡性腫瘤細胞，能自發(fā)分化為紅系、粒系和單核系的可辨識的祖細胞。該細胞表達CD7(25 % )。

 
細胞培養步驟：
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.準備 RPIVM-1640培養基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸鈉O.llg八)，90%;胎牛血清%。

2.培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%*培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
 
2)細胞處理：
復蘇細胞：將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將 細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
 
人慢性髓系白血病細胞 (K562)對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 
細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。懸浮細胞凍存時(shí)，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保上清液（防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯(lián)。
所有動(dòng)物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 
細胞特性：
1)來(lái)源：骨髓
2)形態(tài)：淋巴母細胞樣；圓形，懸浮生長(cháng)
3)含量：>lxl06 個(gè)/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
人慢性髓系白血病細胞 (K562)運輸和保存：使用含有胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養基后轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養，傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。

細胞用途：僅供使用。