1. 常用的保溫方式
保溫的方式除有的 ELISA 儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴。將 ELISA 試劑盒板置于水浴箱中時(shí),ELISA 板底應貼著(zhù)水面,這樣能使溫度迅速平衡。水浴保溫的優(yōu)勢在于能較好地解決因受熱不均衡所致的周?chē)着c中央孔結果的吸光度差異,也就是 “邊緣效應"。
2. 避免蒸發(fā)的方法
為避免蒸發(fā),板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應板漂浮在水面上。這樣既能防止水分蒸發(fā)影響反應體系的濃度,又能保證反應在相對穩定的環(huán)境中進(jìn)行。若用保溫箱,ELISA 試劑盒應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,最后將 ELISA 板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應如此,以確保反應板能夠迅速達到所需的溫度。
3. 反應板放置的注意事項
無(wú)論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。如果反應板疊放,會(huì )導致上下層板之間的溫度擴散不均勻,影響實(shí)驗結果的準確性。室溫溫育的反應,操作時(shí)的室溫應嚴格限制在規定的范圍內,標準室溫溫度是指 20~25℃,但具體操作時(shí)可根據說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),ELISA 試劑盒只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時(shí)間應按規定力求準確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測定,這樣可以更好地控制實(shí)驗條件,確保每個(gè)反應都能在準確的溫度和時(shí)間下進(jìn)行。